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生命科学
酶联免疫吸附测定
流式细胞术
细胞分选
细胞培养
酶联免疫吸附测定

酶联免疫吸附测定 (ELISA) 是一种广泛应用于生物学和医学科学的免疫酶技术,用于定量测定各种生物基质样品中的抗体、抗原、糖蛋白、糖脂等分子。ELISA检测法依赖于抗原-抗体相互作用,结合酶/底物的催化作用,可以特异性识别复杂生物基质中目标分子。目前主要有4种形式的 ELISA 方法,包括直接 ELISA检测法、间接 ELSIA检测法、夹心 ELISA检测法和竞争性 ELSIA检测法。无论采用哪种形式,重要的是选择合适的固定抗原或捕获检测抗体对,以确保方法的特异性和灵敏度。

流式细胞术

流式细胞技术 (FCM) 是利用流式细胞仪将单个细胞传送通过光测量点,经不同波长的散射光,检测到具有荧光标记抗体(和细胞表面抗原组合)的细胞,并在细胞图上记录出来。 FCM 的优势是在于可以在短时间内(几十秒到几分钟)测量大量单个细胞,从而可以揭示细胞群的异质性,并且可以识别、量化和分类不同的细胞亚群以供进一步研究。 FCM越来越多地应用于细胞周期、细胞生理学、免疫表型等研究领域。

细胞分选

磁性细胞分选技术是利用磁性粒子偶联识别细胞表面抗原的高特异性抗体分离特定亚群的活细胞。基于磁场的磁性选择和抗体-抗原的相互作用,将目标细胞从血液或组织中分离出来。该技术被广泛用于从人和动物组织或血液样本中分离全T细胞、CD4+T细胞、单核细胞、B细胞、干细胞、NK细胞、树突细胞、内皮细胞、肿瘤细胞、白细胞、粒细胞等。特定的细胞亚群从磁珠中释放出来,几乎不受任何损伤,可直接用于细胞培养、流式细胞术和基于细胞的检测等下游应用。

细胞培养

细胞培养技术使得在实验室内体外模拟细胞分化和代谢功能成为可能。

原代细胞是从人类或动物供体组织中直接分离出来的细胞,已高度分化且接近起源组织,但通常不具有增殖性。而永生化的细胞系是从肿瘤或组织中分离出来的、可在体外培养并稳定增殖的细胞,但通常在遗传学和表型上与其起源细胞存在较大的差异。

就培养方法而言,多数源自组织的细胞,比如胚胎 (hESCs) 和间充质干细胞、纤维细胞或肝细胞,需要在细胞培养瓶或多孔板或滚瓶的表面贴壁生长。贴壁培养的细胞增殖受到培养容器的可用表面积的限制。血液细胞系或经驯化后的一些组织细胞也可在摇瓶中悬浮生长。经改造的工程细胞系可悬浮培养于生物反应器中,用于大规模生产生物类药品。

应用科学
药物筛选
遗传毒性研究
生物分析
室间质评与能力验证
药物筛选

新药开发过程通常包括临床前研究、临床试验、报批和生产上市4个阶段。药物代谢研究在新药开发的前两个阶段具有重要的指导意义,尤其是在代谢信息不明确的开发早期。

通过利用各种体外代谢模型对候选化合物的代谢特性(如代谢稳定性、代谢产物生成、代谢表型、酶抑制IC50等)进行高通量筛选,可以对代谢过快或生成毒性代谢物的候选化合物进行结构改良,或通过合成活性代谢物或模拟活性代谢物的结构得到新的候选化合物。

与体内代谢研究相比,体外代谢研究可在新药研发早期利用候选化合物的体外代谢参数合理预测候选化合物的体内药动学行为,指导后期药效、药动以及安全性评价的模型选择,缩小体内研究的筛选范围。

遗传毒性研究

遗传毒性研究(Genotoxicity Study)是药物非临床安全性评价的重要内容,与其他研究尤其是致癌性、生殖毒性等研究有着密切的联系,是药物进入临床试验及上市的重要环节。拟用于人体的药物,应根据受试物拟用适应症和作用特点等因素考虑进行遗传毒性试验。遗传毒性试验是指用于检测通过不同机制直接或间接诱导遗传学损伤的受试物的体外和体内试验,这些试验能检测出DNA损伤及其损伤的固定。

遗传毒性试验方法有多种,根据试验检测的遗传终点,可将检测方法分为三大类,即基因突变、染色体畸变、DNA损伤;具体的试验内容包括细菌回复突变试验(Ames试验),体外染色体畸变试验,体外微核试验,体外小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因突变试验,HGPRT基因突变试验,彗星试验等。

IPHASE品牌针对遗传毒性各项试验,分别开发出遗传毒性Ames试剂盒,体外染色体畸变试剂盒,体外微核试验试剂盒,TK染色体畸变试剂盒,HGPRT基因突变试剂盒,彗星试验试剂盒等,大大提高各个遗传毒性试验的完成效率,省去试验试剂配制准备验证等各个环节,大大缩短实验人员实验时间。

生物分析

质谱检测中,不可避免的会遇到基质效应,为了验证基质带来的影响,需要使用空白基质,若分析物为外源性物质(大多数药物,环污染物等)都可以使用正常人或动物的生物样品(血浆,血浆,尿液,胆汁等)作为正常的BLANK,单如果分析物为内源性物质(正常人或动物体内本身含有的皮质醇,胆红素,维生素等),就很难获得空白基质,这种情况下,想要去除生物样本中的内源性物质很难完成,可以使用人工基质,模拟人体或动物体内环境配置而成,成分明确,有效解决内源性物质干扰问题。

IPHASE品牌空白生物基质产品,包括不同种属动物空白血清,血浆,尿液,胆汁,粪便,组织等空白基质,人工血浆,人工尿液,人工胃液,人工小肠液等人工基质,为创新药物研发机构生物分析研究,大分子药物生物分析,小分子药物生物分析,如方法学开发,方法学确证,药代动力学分析,毒代动力学分析等提供专业产品与专业服务。

室间质评与能力验证

室间质量评价也被称作能力验证,是国际公认的临床实验室全面质量管理的重要组成部分,也是医疗机构质量管理的重要内容。室间质量评价是为确定某个实验室进行某项特定校准或检测能力以及监控其持续能力而进行的一种实验室间的比对。

IPHASE拥有专业的综合分子检测平台,十余年分析检测经验,长期为中国疾病预防控制中心,国家食品安全风险评估中心,卫健委临床检验中心,北京市临床检验中心提供能力验证相关标准物质与质控品。

技术应用:
IPHASE/汇智和源 ASO药物体外代谢研究解决方案 2024-07-10
小核酸药物是目前发展最为迅猛的基因疗法之一,将带来“除小分子药和抗体药”之外的第三次制药浪潮。小核酸药物包括反义寡核苷酸(ASO)、小干扰RNA(siRNA)、微小RNA(miRNA)、信使RNA(mRNA)、适配体(aptamer)等。其中,ASO药物是小核酸药物领域发现最早、获批最多的药物类别,也是该领域研发的重要方向之一。 一、ASO药物作用机制 反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASO)指与靶基因mRNA互补的一段单链DNA或RNA序列,长度通常为15-25nt,通过碱基配对原则与其互补的RNA结合,可以调节靶RNA的功能。ASO的作用机制主要分为两大类:一类是基于RNase H1-介导的mRNA降解机制(图1A所示);另一大类是基于ASO结合带来的空间位阻,封闭mRNA关键区域,从而影响mRNA的成熟或者翻译为蛋白质(图1B所示)。 图1 ASO作用机制(图片来源:Nature Reviews Drug Discovery, 2020, 19(10): 673-694) 二、ASO药物体外代谢研究策略 和传统小分子药物一样,在药物临床前研究阶段,通常需要对ASO药物进行体外代谢研究,并提供代谢途径及其产物相关信息。ASO药物的代谢酶主要为核酸外切酶和核酸内切酶,广泛分布于血液和各个组织器官,一个合适的体外代谢研究体系,能够最大程度地预测体内的情况,对于ASO药物的早期筛选非常重要。表1所示为常用的ASO药物体外代谢研究体系。 表1 ASO药物的体外代谢研究体系 生物基质 试验类型 备注 血清/血浆 代谢稳定性,血浆蛋白结合试验 金属螯合剂抗凝的血浆不适合代谢稳定性研究;ASO药物血浆蛋白结合试验可选择超滤法和超速离心法。 肝S9 代谢稳定性,代谢产物鉴定 肝S9一定程度上可以代替肝组织匀浆使用。 肝微粒体 代谢稳定性 肝微粒体的核酸酶活性较低,但也有文献报道人肝微粒体也能代谢ASO化合物。 肝组织匀浆 代谢稳定性,代谢产物鉴定 酶体系比较全面,推荐用于ASO药物的体外筛选评价。 肝细胞 代谢产物鉴定,细胞摄取试验 肝细胞酶体系最为完善,适用于肝靶向的ASO药物研究。 溶酶体 代谢稳定性 溶酶体具有丰富的酶体系,包括核酸酶和各种水解酶等,是研究ASO药物代谢稳定性的高效实验体系。 脑组织匀浆、脑脊液 代谢稳定性,脑组织匀浆和脑脊液蛋白结合试验 对于神经系统及神经肌肉适应症类的ASO药物,可选择脑组织匀浆和脑脊液进行体外相关研究。 需要指出的是,在药物研发前期只用1-2个体外代谢体系去正确预测体内稳定性或代谢情况是非常困难的。因此建议在早期ASO药物筛选时进行多体系代谢研究相互验证,不断优化试验方案,进而选择与体内相关性最佳的体外代谢体系进行筛选研究。 三、IPHASE相关产品 为满足客户对于ASO药物体外代谢研究的需求,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,凭借先进的设备,专业的技术人员和多年研发的经验,开发出来多种用于ASO药物体外代谢研究的产品,助力广大客户进行ASO药物早期筛选研究。 类别 分类     亚细胞组分 肝溶酶体 酸化肝匀浆液 肝/肠/肾/肺S9 肝/肠/肾/肺微粒体 肝/肠/肾/肺胞质液 原代肝细胞 悬浮肝细胞 贴壁肝细胞 专属血浆 血浆稳定性 血浆蛋白结合 空白生物基质 空白脑组织 空白脑脊液 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES Co.,Ltd. / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 推出CYP家族重组酶及SLC家族转运体新产品 2024-07-03
在临床应用中患者经常会同时使用多种药物,这些药物可能会产生药物-药物相互作用(Drug-drug interaction,DDI),最终导致严重不良反应或减弱治疗效果,因此,有必要对 DDI 发生的可能及其影响程度和严重性进行科学评估。药物相互作用按照发生机制可分为理化性质、代谢酶、转运体、靶点及疾病介导的相互作用,按照影响指标可分为药代动力学相互作用和药效动力学相互作用,而开展体外试验就是为了全面了解在研药物的药代动力学(Pharmacokinetics,PK)特征,以初步估计药代动力学相互作用的可能机制以及可能的严重程度,并支持 DDI 临床研究时机的确定。鉴于此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,致力于开发CYP重组酶和ABC、SLC转运体产品,助力广大客户进行人源化体外药代动力学及可能潜在的 DDI 研究。 一、重组酶CYP2A6/ CYP2D6 药物代谢发生在肝脏、小肠、肾等组织中,肝脏是代谢的主要器官,其微粒体酶活性最强,其中最重要的氧化酶因其在还原状态下可与 CO 结合,在波长 450 nm 处有一最大吸收峰,故认为是细胞色素 P450 酶。位于肝脏内质网和线粒体内膜上的 CYP450 是参与药物Ⅰ相代谢的关键酶,经酶催化的氧化反应是药物体内代谢的主要途径,参与80%~90%药物的Ⅰ相代谢。因此,可通过检测 CYP450 酶活性,了解药物的体内代谢过程,预测药物疗效和不良反应。同时,《药物相互作用指导原则2020》也指出“申请人应在首次人体试验之前开展体外代谢研究,鉴定主要代谢产物,为临床前安全性数据外推到人体提供必要的信息,并为临床研究设计提供参考。 鉴于此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,继研发CYP2C8、CYP2C9后,再次以HEK298细胞为载体,成功构建“CYP2A6+reductase+b5、CYP2D6+reductase+b5和CYP2D6+reductase”三种重组酶。IPHASE技术人员在4℃进行重组酶制备,并通过不同底物的代谢产物生成率来验证重组酶的活性。即IPHASE技术人员调整重组酶终浓度为25pmol/ ml,并分别以终浓度为0.8uM的香豆素和终浓度为0.4uM的右美沙芬为CYP2A6+reductase+b5和CYP2D6+reductase+b5、CYP2D6+reductase的底物,在37℃下将底物和重组酶共同孵育5min,结果显示底物均有代谢,并可得到其产物生成率,表明“CYP2A6+reductase+b5、CYP2D6+reductase+b5和CYP2D6+reductase”这三种重组酶研发成功! Recombinase Marker Substrate Reaction Rate CYP2A6+reductase+b5 Coumarin 64.5 pmol/min/mg protein CYP2D6+reductase Dextromethorphane 122.3 pmol/min/mg protein CYP2D6+reductase+b5 Dextromethorphane 273.9 pmol/min/mg protein 同时,为表明重组酶活性,IPHASE技术人员以相同条件,使用自研产品和竞品同时进行上述试验,结果显示IPHASE CYP2A6+reductase+b5、CYP2D6+reductase+b5及CYP2D6+reductase三种重组酶验证活性均同竞品相似或高于竞品,表明IPHASE重组酶活性较好,满足客户需求! 二、转运体OATP1B1/OATP1B3 转运体在人体全身组织中均有表达,通过影响药物的吸收、分布和消除而影响药物的药代动力学和药效学特征。根据功能可将转运体分为摄入型转运体(SLC)和外排型转运体(ABC)。OATP1B1和OATP1B3属于SLC家族,是肝细胞窦状隙膜上表达的主要摄取转运体,在多种药物的肝脏摄取中发挥重要作用。OATP1B1、OATP1B3的底物众多,很多在结构上不相关的药物也会经由其转运,因此,在体外研究其与化合物的关系至关重要!目前已明确属于OATP1B1及OATP1B3的底物、抑制剂及诱导剂如下所示: 基因符号-SLCO1B1 底物:阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、罗舒伐他汀、辛伐他汀酸、依那普利、非索非那定、甲氨蝶呤、缬沙坦、波生坦、奥美沙坦、阿曲生坦、利福平、SN-38、伊立替康、头孢托仑、瑞格列奈、西罗莫司、杀奎那韦、洛匹那韦、头孢哌酮、头孢唑林及托拉塞米; 抑制剂:环孢素、吉非贝齐、利福平、罗红霉素、泰利霉素、利托那韦、杀奎那韦、奈非那韦、西地那非、阿托伐他汀酸、辛伐他听、辛伐他汀酸、阿托伐他汀酯、洛伐他汀、洛伐他汀酸、格列本脲、贯叶金丝桃素、紫杉醇、瑞格列奈、替米沙坦、他克莫司、曲格列酮; 诱导剂:双氯芬酸、布洛芬、罗美昔布; 基因符号-SLCO1B3 底物:波生坦、地高辛、依那普利、红霉素、非索非那定、氟伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、罗舒伐他汀、利福平、奥美沙坦、替米沙坦、阿曲生坦、缬沙坦、伊马替尼、甲氨蝶呤、紫杉醇、多烯紫杉醇、CCK-8、头孢拉定、头孢唑林、头孢美唑、头孢托仑、头孢氨苄、萘夫西林; 抑制剂:环孢素、利福平、红霉素、罗红霉素、克拉霉素、泰利霉素; 诱导剂:双氯芬酸、布洛芬、罗美昔布; 资料来源:有机阴离子转运多肽OATP1B1、OATP1B3 的基因多态性及其介导的药物相互作用研究进展 鉴于此,IPHASE继成功研发转运体MATE2-K、OAT1、OAT3和OCT2后,再次以HEK293为细胞载体,成功构建瞬时转染重组OATP1B1、OATP1B3转运体。IPHASE技术人员以终浓度为1 μM的普伐他汀钠(Deoxycholic acid, sodium salt)为底物,通过LC-MS/MS检测空载细胞HEK293和转运体细胞OATP1B1、OATP1B3细胞对普伐他汀钠的代谢能力,结果显示转运体细胞OATP1B1底物代谢量为HEK293细胞底物代谢量的13倍,OATP1B3则为34倍!均远高于《药物相互作用指导原则2020》规定的2倍,表明OATP1B1和OATP1B3转运体细胞模型构建成功! 三、IPHASE相关产品 除了最新研发的重组酶CYP2A6和转运体OATP1B1、OATP1B3细胞,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,相继开发出了多种重组酶及转运体细胞相关产品,助力广大客户体外研究。 分类 产品名称 规格 CYP重组酶 CYP2A6+reductase+b5 0.5mL, 0.5nmol CYP2D6+reductase 0.5mL, 0.5nmol CYP2D6+reductase+b5 0.5mL, 0.5nmol CYP2C8+reductase+b5 0.5mL, 0.5nmol CYP2C9+reductase+b5 0.5mL, 0.5nmol UGT重组酶 UGT1A1 0.5mL,5mg/mL UGT1A3 0.5mL,5mg/mL UGT1A4 0.5mL,5mg/mL UGT1A6 0.5mL,5mg/mL UGT1A9 0.5mL,5mg/mL UGT1A10 0.5mL,5mg/mL UGT2B17 0.5mL,5mg/mL 转运体细胞 OATP1B1细胞 8-10 million cells OATP1B3细胞 8-10 million cells OAT1细胞 8-10 million cells OAT3细胞 8-10 million cells OCT2细胞 8-10 million cells MATE2-K细胞 8-10 million cells IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES Co.,Ltd. / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 PROTAC体外DMPK研究一站式产品解决方案 2024-06-20
小分子药物因为其可口服的高便利性,易吸收、易穿透细胞膜的高可成药性,成为现代药物开发的基石。但传统的小分子药物采用的是“占位驱动”模式来抑制蛋白功能,导致包括受体、激酶及通道类型等靶点在内的基因仅有约400种可作目标药物,而已知的可成药的基因约3000种。因此,“事件驱动”模式蛋白降解靶向嵌合体(Proteolysis-Targeting Chimera, PROTAC)技术为新药研发提供了新思路,并成为新药研发的一大利器。 一、蛋白降解靶向嵌合体简介 PROTAC是一种异双功能分子,结构由两个配体通过Linker连接而成,其中一个配体可结合目标蛋白(Protein of interest, POI),另一个配体可以靶向E3连接酶。其本质是存在于所有真核生物中的天然蛋白降解机制——泛素-蛋白酶体途径(Ubiquitin-Proteasome Pathway, UPP)。该途径涉及一个三酶级联反应,即泛素分子在泛素激活酶(E1)、泛素结合酶(E2)及泛素连接酶(E3)等系列酶作用下,将细胞内蛋白质分类并选中靶蛋白,并对靶蛋白进行特异性修饰,最终形成靶蛋白多聚泛素链并被蛋白酶体识别和降解。其中,E1激活酶和E2结合酶参与的过程称为泛素的激活,单独的泛素本身并没有任何生物功能,只是一种分子标记蛋白,发挥作用的前提是必须有ATP来提供能量。 图片来源:Autophagy and the ubiquitin-proteasome system: collaborators in neuroprotection. 因此,PROTAC是一种“事件驱动”的模式,即它可以和靶蛋白任何位置结合,且不需要高亲和力,就可以诱导靶蛋白降解。PROTACA分子在进入细胞后,其目标蛋白配体可特异性结合靶蛋白,另一端可募集E3连接酶,最终形成POI-Linker-E3 Ligase三元复合物,拉近E3连接酶和靶蛋白的距离,从而诱导E3连接酶为靶蛋白贴上泛素标签,继而促进靶蛋白的降解。随着靶蛋白降解而掉落下来的PROTAC分子可继续被循环利用。 图片来源:Discovery of a first-in-class CDK2 selective degrader for AML differentiation therapy 二、蛋白降解靶向嵌合体体外研究难点 尽管PROTAC因其独特作用机制具有突破性的优势,但PROTAC分子的开发仍面临大量挑战。 口服给药是大多数疾病治疗的理想给药方式,但PROTAC由于其独特的分子结构并不满足“分子量小于500;氢键供体数目小于5;氢键受体数目小于10;脂水分配系数小于5和可旋转键的数量不超过10个”的经典小分子药物类药五原则。PROTAC分子量通常在600~1200 Da之间,一般可达到700 Da以上,且一般伴有溶解性较差、体内外渗透性表现不佳,口服生物利用度通常偏低及吸收较差等情况。 此外,相较于暴露量越多越好的传统小分子药物来说,PROTAC由于结构的复杂性,具有新的挑战。通常,在合适的或相对较低的浓度下,PROTAC可诱导靶蛋白和E3连接酶形成“靶蛋白PROTAC-E3连接酶”三元复合物;然而,当浓度过高时,就易竞争性地出现“靶蛋白-PROTAC”或“E3连接酶-PROTAC”等二元复合物,即“钩子效应”,导致药效降低甚至出现毒性积累。因此,适时地调整PROTAC剂量对于靶向治疗至关重要。 目前现有研究表明PROTAC分子在各种属中均呈现较高的血浆蛋白结合状态,常规的血浆蛋白结合试验可能无法准确的体现其血浆蛋白结合率,而血浆蛋白结合率的测定是必须的。血浆蛋白结合试验可测定化合物在血浆中的稳定性,以防止化合物在高血浆蛋白结合率的情况下出现药物代谢过缓并导致化合物不被清除的现象。同时,PROTAC分子本身结构特殊,分子量大,为提高其渗透性与溶解度,在药物设计时往往需要引入杂原子,且Linker部分在代谢层面其代谢产物的产生可能发生药物毒性作用或药效不足的现象,因此,对PROTAC分子代谢产物的鉴定至关重要。 而根据《药物相互作用研究技术指导原则》,了解转运体介导的药物相互作用也是评价体外药代动力学的重要内容之一。早期常采用Caco2细胞、高表达BCRP细胞或高表达BCRP膜囊泡进行体外评估,然而由于PROTAC分子结构的特殊性,其渗透性一般较差,采用完整的细胞结构可能低估PROTAC分子对外排转运体的抑制作用。 综上所述,对PROTAC分子进行体外DMPK研究至关重要,然而,目前尚无定项针对PROTAC药物研究的指导原则,因此,在实际研究中,研究者往往会参照小分子药物研究的指导原则。 三、PROTAC体外研究策略 尽管PROTAC是一种暂无指导原则的新兴小分子药物,但它“事件驱动模式”的功效性促使药物研发领头军们对其展开了孜孜不倦的研究。目前国内部分药企对PROTAC分子药物的开发已接近国际水平并达到了临床阶段。 图片来源:clinicaltrials, chinadrugtrials,太平洋证券整理 目前常规检测化合物的溶解度通常是利用PH 7.4的磷酸缓冲液,但已有研究报道PROTAC分子在不同状态下(禁食/非禁食)的肠液中其溶解度显著不同,即在肠液中PROTAC分子溶解度相对更高,且非禁食状态下的溶解度效果优于禁食状态的肠液。针对渗透性研究,PROTAC分子的研究遵循了常见的体外模型结构,即可利用Caco2、MDCK和LLC-PK1等模型。 而为防止“钩子效应”、确定血浆蛋白结合率和代谢产物等情况,对PROTAC分子进行体外代谢研究是至关重要的!PROTAC分子体外DMPK研究一般也遵循小分子药物的研究方式,即了解PROTAC药物的代谢关键酶、选择合适的体外模型及测定其血浆稳定性等。 确定代谢关键酶 对PROTAC进行体外药代动力学研究,除了基本的I相(CYP酶)代谢和II相(UGT酶)代谢,已有报道发现醛氧化酶(Aldehyde oxidase, AOX)可参与PROTAC分子的代谢,但存在明显的种属差异,需要多种属验证确保数据真实性。 全血/血浆稳定性试验 作为体外药代动力学早期研究的试验之一,全血中含有丰富的水解酶类,可催化药物的水解代谢,且根据经验发现,全血中不稳定的化合物一般含有酰胺键、磺酰胺键、肽键及酯键等官能团,由此可进一步推断导致PROTAC在全血中不稳定性的位置的可能性。 血浆蛋白结合率测定 已知PROTAC分子在各种属中均呈现较高的血浆蛋白结合状态,所以对其进行种属间比较或体外-体内外推(in vitro-in vivo extrapolation, IVIVE)时需充分考虑化合物在孵育体系中的游离率和全血中游离率数据。 常见的体外代谢研究模型如下: 鉴于PROTAC分子溶解性对外排转运体研究的影响性,采用高表达BCRP膜囊泡模型更具说服力,即膜囊泡可使ABC转运体的底物结合位点暴露于细胞外缓冲液中,更适用于研究候选药物作为底物和抑制剂与ABC转运体的相互作用。 四、IPHASE体外DMPK研究“一站式”产品解决方案 IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,紧随药物开发前沿,针对PROTAC分子药物体外DMPK研究方向,研发了多种类、多层次、多领域的体外生物试剂,助力PROTAC药物临床前阶段研究! 产品类别 组分分类 名称 亚细胞组分试剂 肝微粒体 人/猴/犬/兔/大鼠/小鼠/地鼠/猫/小型猪 微粒体 肝S9 人/猴/犬/大鼠/小鼠/小型猪 S9 肝胞质液 人/猴/犬/大鼠/小鼠/小型猪 胞质液 原代肝细胞产品 / 人/猴/犬/大鼠/小鼠/小型猪 悬浮/贴壁原代肝细胞 转运体产品 ABC 家族转运体 人类BCRP/BSEP/MDR1/MRP1/MRP2/MRP3/MRP4/MRP8 ABC转运体 SLC 家族转运体 人类 OATP1B1/OAT1/OAT3/OCT2/ OATP1B3/OATP2B1/OCT1/NTCP/MATE1/MATE2K/OATP1A2 SLC转运体细胞 重组酶产品 CYP 人CYP 1A2+/2A6+/2B6+/2C8+/2C9+/2C19+/2D6+/2E1+/3A4+/1A1+/3A5+ 还原重组酶 UGT 人UGT 1A1/1A3/1A4/1A6/1A7/1A8/1A9/1A10/2B7/2B15/2B17 重组酶 血浆相关产品 血浆蛋白结合试剂 人/猴/犬/大鼠/小鼠血浆蛋白结合试剂 平衡透析装置 血浆蛋白结合试验平衡透析装置 平衡透析膜 血浆稳定性试验产品 人/猴/犬/大鼠/小鼠 空白血浆(稳定性专用)/全血 缓冲液 / PH 7.4 磷酸缓冲液 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 参考文献: [1] 药明康德,《药物代谢与动力学:前沿、策略与应用实例》。 [2] Churcher, I., 2018. Protac-Induced Protein Degradation in Drug Discovery: Breaking the Rules or Just Making New Ones? Journal of Medicinal Chemistry 61, 444–452. [3] Békés M, Langley DR, Crews CM. PROTAC targeted protein degraders: the past is prologue[J]. Nat Rev Drug Discov. 2022 Mar;21(3):181-200. [4] Goracci L , Desantis J , Valeri A , et al. Understanding the Metabolism of Proteolysis Targeting Chimeras (PROTACs): The Next Step toward Pharmaceutical Applications[J]. Journal of Medicinal Chemistry, 2020, 63(20):11615–11638. [5] 《药物相互作用研究技术指导原则》。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES Co.,Ltd. / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
全面匹配标准要求!IPHASE新版Ames试剂盒都有这些变化! 2024-06-05
Ames试验建立以来,在全球范围内应用了近五十年,是评价化合物致突变性的一种经典方法。随着人们对Ames试验认同度的不断提高,Ames试验已成为遗传毒理学不可或缺的一个检测项目,使用此方法测试的化合物已达上万种,并且测试结果在很多生物试验中证实了其效用性。当前,Ames试验在食品、药品、化学品、化妆品、农药、医疗器械、消毒产品、环境等多个领域中得到了广泛的应用,成为产品研发和申报阶段必须开展的遗传毒性试验。 目前,Ames试验主要参照OECD标准、各领域的国家标准、行业标准或指导原则进行,试验所用试剂和成分复杂且制备繁琐,且要保证试验结果符合相关方法要求一般需要经验的积累和数据的收集,诱导S9的制备、相关试剂的配制和符合要求的菌液的制备成为了本试验的限速步骤,要完成一次结果准确且理想的实验往往需要几周甚至几个月的时间,试验结果的不可控性常常令工作者望而却步。 IPHASE遗传毒性Ames试剂盒的推出给研究者带来了新的希望,它不仅仅为Ames试验的开展提供了便捷的工具,更是将难理解的标准简单化,将复杂的试验流程标准化,真正做到了急客户所急,想客户所想!自2012年上市至今,IPHASE未曾停下探索的脚步,积极接收并收集研究者使用Ames试剂盒后的反馈意见,并不断验证和优化,现已成功推出新版Ames试剂盒,欢迎大家垂询! 下面,我们来一起聊一聊IPHASE新版Ames试剂盒到底做了哪些升级? 通用的遗传毒性Ames试剂盒如何匹配不同领域的Ames试验要求? 技术人员对目前现行有效的不同领域国家标准、行业标准、指导原则等进行了系统的研读,该试验整体要求保持一致,但也会存在一些细节上的差异,如底层培养基配制,食品GB 15193.4和医疗器械YY/T 0870.1是一致的,但化妆品安全技术规范、农药登记GB/T 15670.14却和其它都不相同。基于以上问题,IPHASE在试剂盒使用方法上做了明确区分,从而实现了通用Ames试剂盒可适用于不同标准。 试剂盒组分GS、VS、HBT等,傻傻分不清楚? IPHASE旧版遗传毒性Ames试剂盒中产品组分大多使用本公司内部代号,了解到客户对该组分名称存在困惑,我们在新版试剂盒中特对其进行修改,组分名称可完全与各领域指导原则或标准匹配,打消客户疑虑。具体修改信息如下: 序号 旧版名称 新版名称 1 底层培养基VS 磷酸盐贮备液(V-B) 2 底层培养基GS 40%葡萄糖溶液 3 HBT溶液 组氨酸-色氨酸-生物素溶液 菌株难匹配、试剂配制繁琐? 因Ames试验暂无试剂盒法的标准,故如需严格按照标准要求开展试验,菌株需新鲜制备。但是,Ames试验除菌株外,还需配备诱导大鼠肝S9,磷酸盐贮备液(V-B)、40%葡萄糖及其它系列试剂,IPHASE为解决客户诱导大鼠肝S9及其它配套试剂配制繁琐和困难的问题,特推出不含菌株的遗传毒性Ames试剂盒,方便客户使用。 标准诱变剂受管制,保存使用受限制? 标准诱变剂是证明Ames试验有效和试验体系正常工作的标尺,但有些标准诱变剂已列入危险化学品名录,如叠氮化钠应按照剧毒化学品的标准管理程序进行采购、入库、贮存、领用、运输和记录,使用过程更是需要小心又小心。IPHASE经过不断筛选,成功实现了标准诱变剂的替代,在满足试验要求的基础上,也提高了试验的安全性。 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES CO,LTD / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 siRNA药物体外代谢研究解决方案 2024-05-28
核酸药物凭借其独特的技术特点成为近年来新药研发领域关注的焦点。核酸药物包括小干扰RNA(siRNA)、反义寡核苷酸(ASO)、微小RNA(miRNA)、小激活RNA(saRNA)、信使RNA(mRNA)、适配体(aptamer)和抗体核酸偶联药物等,是基因治疗的一种形式。其中siRNA药物作为核酸药物研发的热点,凭借基因沉默效率高、不良反应可控、合成方便等优点,在新药研发领域得到了广泛应用,有望成为继小分子和抗体药物后最有希望开发出新药的药物。 一、SiRNA药物作用机制 小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)又称为沉默RNA、短干扰RNA或非编码RNA,是一类长度在21~25bp的短双链RNA分子。合成的siRNA通过胞吞作用进入细胞中,随后少量的siRNA能够从溶酶体中逃逸进入细胞质,进入细胞质后,siRNA 被合并到 RNA诱导的基因沉默复合物中(RNA-induced silencing complex,RISC),随后siRNA分离成两条单链:正义链(sense strand)和反义链(antisense strand),之后正义链被剪切在细胞质中降解,而结合反义链的RISC被活化并且特异性地结合靶mRNA并切断靶mRNA,引发靶mRNA的降解,从而阻断靶蛋白的翻译。 图1 SiRNA作用机制 (图片来源:Eur J Pharmacol.2021;905:174178) 二、SiRNA药物代谢研究策略 SiRNA药物在体内主要被血浆和组织中广泛存在的核酸内切酶和核酸外切酶所代谢,而不是通过肝脏的Ⅰ相和Ⅱ相代谢酶代谢。目前上市的siRNA药物经过结构改造后,在血液循环中较少被代谢。通常绝大部分siRNA药物被肝脏迅速摄取,小部分分布在其他组织,在肝脏或其他组织中经由核酸酶代谢。对于siRNA药物体内代谢研究,通常是对动物体内的血浆、尿液、粪便及靶向组织(肝或肾等)进行代谢产物鉴定和定量生物分析。  然而在药物早期筛选阶段,化合物数量很多,动物体内试验周期较长,成本很高,很难通过体内试验大批量进行化合物筛选或结构优化。因此,合适的体外代谢研究对于siRNA药物的早期筛选尤为重要。体外代谢研究具有通量大,实验周期短等优势,更有助于我们提高对于siRNA药物的筛选速率。表1所示为常用的siRNA药物的体外代谢研究体系。 表1 siRNA药物的体外代谢研究体系 基质 适用范围 血清/血浆 评估siRNA药物在血液循环系统中的代谢稳定性情况,一般是体外siRNA药物的必检项。 肝S9 含有肝组织中大部分酶且容易获取,一定程度上可以代替肝组织匀浆使用。 肝组织匀浆 酶体系比较全面,推荐用于siRNA药物的体外筛选评价。 肝细胞 酶体系最为完善,适用于肝靶向的siRNA药物代谢评价。 溶酶体 溶酶体是siRNA药物通过胞吞进入细胞后的主要接触的环境,具有丰富的酶体系,包括核酸酶和各种水解酶等,是siRNA代谢的重要场所,是研究siRNA药物代谢稳定性的高效实验体系。 三、IPHASE相关产品 为满足客户对于siRNA药物体外代谢研究的需求,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,凭借先进的设备,专业的技术人员和多年研发的经验,开发出来多种用于siRNA药物体外代谢研究的产品,助力广大客户进行siRNA药物早期筛选研究。 合规性 生产产品的组织均由正规渠道获得,来源清晰。 安全性 生产人员及动物均经过传染源检测,保证产品质量安全。 纯度高 细胞纯度可达到90%以上。 活率高 细胞活率可达85%以上,满足客户需求。 复苏率高 冻存复苏率可达90%以上。 可定制 可根据客户特殊需求,提供特殊种属、特殊组织细胞的定制服务。 以下为IPHASE部分产品列表 类别 分类 亚细胞组分 肝溶酶体 酸化肝匀浆液 肝/肠/肾/肺S9 肝/肠/肾/肺微粒体 肝/肠/肾/肺胞质液 原代肝细胞 悬浮肝细胞 贴壁肝细胞 专属血浆 血浆稳定性 血浆蛋白结合 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES CO,LTD / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 多领域遗传毒理Ames试验试剂盒全新升级 2024-05-23
细菌回复突变试验(Bacterial Reverse Mutation Test),亦称Ames试验,于1975年由美国加利福尼亚大学伯克利分校生化系B.N.Ames教授实验室建立并不断发展完善,至今已成为国际上通用的遗传毒理评价体系的必检项目,同时也是许多遗传毒理学新兴技术发展过程中对照验证结果的试验之一,广泛应用于化合物的致突变性和潜在致癌性的初筛检验。 一、Ames试验简介 Ames试验是以营养缺陷型的突变体菌株为指示生物来检测基因突变的体外试验,可预测受试物的遗传毒性和潜在致癌性。常用的菌株有组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌和色氨酸营养缺陷型的大肠杆菌。 其原理是利用鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌来检测点突变,涉及DNA的一个或几个碱基对的置换、插入或缺失。鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌试验菌株在无组氨酸或色氨酸的培养基上不能生长,在有组氨酸或色氨酸的培养基上才能正常生长。致突变物存在时可将营养缺陷型菌株回复突变为原养型,即在无组氨酸或色氨酸的培养基上也能正常生长。因此可根据菌株形成数量来判断受试物是否具有致突变作用。同时,受试物检测应在有和没有代谢活化系统的条件下进行试验,因为某些致突变物仅在有代谢活化后才能发生细菌回复突变情况。 二、IPHASE相关产品 Ames试验的开展主要参照OECD标准、国家标准或指导原则等,试验流程复杂,试验所需试剂多样且制备繁琐,要保证试验结果稳定、可靠、可重现性良好往往需要丰富的经验和不断的数据积累,要完成一次理想的试验往往需要耗费大量的人力、物力及资源,故常常令科研工作者望而却步。 因此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,凭借多年的经验和专业的技术人才,遵循食品、农药、化学品、化妆品、医疗器械及药品等多个方向的国家遗传毒性研究技术指导原则,开发了一系列不同领域下的Ames试验组分试剂盒,确保其内组分、浓度及名称等信息均完全匹配国家标准,为广大客户省去了溶液配制时间,大大缩短了试验周期。 便捷性 省去试剂配制的时间,可以直接使用,大大缩短了实验周期。 准确性 试剂盒各成分均经过严格的质量检测,实验结果准确、可靠、重现性高。 稳定性 试剂盒稳定性强、易于运输和保存。 应用广 应用范围广,可用于食品、药品、化妆品、化学品、医疗器械、农药等的遗传毒性研究。 此外,针对拓展项目等初次接触细菌回复突变试验或暂无菌株等数据、经验积累的客户,IPHASE同时推出针对食品、农药、化学品、化妆品、医疗器械及药品等不同领域下的新升级版标准Ames试验试剂盒,其内组分、浓度及名称完全匹配特定领域下的细菌回复突变试验国家标准。IPHASE将营养缺陷型菌株固态化(冻存菌液)、将代谢活化系统简便化、将所有配套试剂成品化,真正实现了“一站式”试验的目的。同时根据不同的试验目的,IPHASE也推出了不同规格的产品,可满足客户的不同需求。 本次开发、升级产品将于6月准时上线,在此,IPHASE期待与不同领域下客户的深入交流,望广大客户敬请期待! IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES CO,LTD / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 微核试验检测方法—流式细胞术 2024-05-17
微核(micronucleus,简称MCN),也叫卫星核,是真核生物细胞在有丝分裂后期由于染色体片断丧失着丝粒从而游离于细胞质中的一种异常结构,是染色体畸变的一种表现形式。微核是细胞有丝分裂后期染色体有规律地进入子细胞形成细胞核时,仍留在细胞质中的整条染色单体或染色体的无着丝粒断片或环。这些片段或染色体在分裂末期不能进入主核,在子细胞进入下一次分裂间期时,便浓缩成主核之外的小核,即微核。目前有辐射、化学诱变剂等较多理化因素可引起染色体断裂,且均可导致细胞分裂从而产生微核现象。 一、 微核试验的简介 微核试验是一种建立在细胞水平上分析DNA损伤的技术,其目的是以微核作为遗传毒性检测终点,用于检测染色体断裂剂及非整倍体诱导剂,是目前公认的筛选致突变物的主要方法之一,在化合物遗传毒性评价系统中占据着重要的地位。 阴性对照 阳性对照 微核试验可分为体外微核及体内微核试验,体外微核试验常以CHL、V79及CHO-K1细胞作为试验系统,而体内微核试验使用较多的是啮齿类动物的嗜多染红细胞(PCE)或者网织红细胞(RET)。PCE或RET是有丝分裂后期的红细胞由幼年发展为成熟红细胞过程中的一个阶段,此时红细胞的主核已排出,而微核仍保留在细胞质中并十分易于辨认。因此,嗜多染红细胞或网织红细胞是体内微核试验的首选细胞群。 图片来源:小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的形成(Cole et al,1979,1981) 二、 流式体内微核检测 除了人工阅片等常规检测方法外,流式细胞术等自动化检测方法也被用于微核检测。流式细胞术(Flow cytometry)检测方法是20世纪70年代发展起来的定量测定细胞和亚细胞成分的方法。该方法通过流式细胞仪以激光束为光源,将待测样品进行荧光染色,然后在液体载体里将单个细胞通过激光束产生的荧光信号转变为电信号,最终通过仪表显示来达到定量测定的目的。 利用流式细胞术进行体内微核鉴定则是由于与成熟的红细胞相比,未成熟的网织红细胞仍然含有RNA和某些表面蛋白质(比如转铁蛋白受体,也称为CD71),因此可用RNase降解RNA以排除RNA的干扰,且不同抗体可用于区分不同细胞或成分,如CD71抗体可区分网织红细胞和成熟红细胞,CD61抗体可用于排除血小板的干扰,而后可用PI染液对DNA进行染色,从而轻易鉴别出微核。流式体内微核检测流程如下: 三、IPHASE相关产品 流式细胞术微核检测具有检测速度快、结果客观可靠及可满足高通量检测要求等特点,因此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,凭借先进的设备,专业的技术人员和多年研发的经验,现正在开发小鼠体内微核试验流式检测试剂盒。小鼠染毒处理后,于不同时间点收集外周血,便可用该试剂盒进行流式微核检测。试剂盒提供了用于小鼠外周血流式微核检测的主要试剂,包括抗凝剂、RNase溶液、CD71、CD61荧光抗体、生物标准品及PI染液等,且试剂盒各组成成分均经过严格的质量检测,实验结果准确、可靠、重现性好。 与体内微核检测试验一样,体外微核检测在预测致癌危险性、检测非整倍体诱发剂及其它遗传危害方面也具有重要的地位。IPHASE现已开发出了包括采用人工阅片方法的体外微核试验试剂盒在内的一系列专门用于体外遗传毒性研究的产品,助力广大客户进行体外遗传毒理学研究。 名称 规格 体外微核试验试剂盒 5mL*32 test 遗传毒性Ames试剂盒 100/150/200/250 dishes 遗传毒性Mini-Ames试剂盒 6孔板*24板/6孔板*40板 微量波动Ames试剂盒 16*96 wells/ 4*384 wells UMU遗传毒性试剂盒 96 wells TK基因突变试剂盒 20ml*36 test HGPRT基因突变试剂盒 20ml*36 test 体外染色体畸变试剂盒 5mL*30 test 彗星试验试剂盒 20/50 test 便捷性 省去诱导S9制备、试剂配制的时间,大大缩短了实验周期。 准确性 试剂盒各成分均经过严格的质量检测,实验结果准确、可靠、重现性高。 稳定性 试剂盒稳定性强、易于运输和保存。 应用广 应用范围广,可用于食品、药品、化妆品、化学品、医疗器械、农药等的遗传毒性研究。 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES CO,LTD / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
喜讯:河北工业大学使用IPHASE肝微粒体发表高质量文章(IF=6.1) 2024-05-11
近日,河北工业大学生物物理研究所马标老师,使用IPHASE品牌产品:人肝微粒体在《Journal of Agricultural and Food Chemistry》权威期刊上发表文章《Liensinine, a Novel and Food-Derived Compound, Exerts Potent Antihepatoma Efficacy via Inhibiting the Kv10.1 Channel》,影响因子6.1! 本论文中,对课题组提出的药物结合袋进行了虚拟筛选,并确定了一种高效的Kv10.1通道抑制剂Liensinine,可以高效抑制通道电流,IC50为0.24±0.07 μM。分子动力学模拟和定点突变实验揭示了其抑制Kv10.1通道的分子机制。同时抗肿瘤实验分析了Liensinine在体内外均能抑制肝癌细胞的增殖。另外,使用IPHASE肝微粒体产品以体外代谢反应体系探究了其I相代谢情况。综上所述,提出一种食品来源化合物,Liensinine,可以作为靶向Kv10.1的抗肝癌治疗药物的先导化合物。 摘要 Plant metabolites from natural product extracts offer unique advantages against carcinogenesis in the development of drugs. The target-based virtual screening from food-derived compounds represents a promising approach for tumor therapy. In this study, we performed virtual screening to target the presumed inhibitor-binding pocket and identified a highly potent Kv10.1 inhibitor, liensinine (Lien), which can inhibit the channel in a dose-dependent way with an IC50 of 0.24 ± 0.07 μM. Combining molecular dynamics simulations with mutagenesis experiments, our data show that Lien interacts with Kv10.1 by binding with Y539, T543, D551, E553, and H601 in the C-linker domain of Kv10.1. In addition, the interaction of sequence alignment and 3D structural modeling revealed differences between the C-linker domain of the Kv10.1 channel and the Kv11.1 channel. Furthermore, antitumor experiments revealed that Lien suppresses the proliferation and migration of HCC both in vitro and in vivo. In summary, the foodderived compound, Lien, may serve as a lead compound for antihepatoma therapeutic drugs targeting Kv10.1. 完整版文献可在【IPHASE】公众号后台留言【获取文章】 再次恭喜文献发表,以及对我司产品的认可,希望以上文献能帮助大家了解目前研究进展及我们的核心技术,欢迎各位新老客户联系我们咨询、提出意见,愿我们的努力成果与您的科研碰撞出不一样的火花! 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES CO,LTD / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC效应) 2024-05-08
抗体由Fab端和Fc端组成,其中Fab端主要发挥抗原结合功能,而Fc端决定抗体的效应功能,就包括抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC),即所谓的ADCC效应。 一、 ADCC效应的概念 当IgG抗体通过Fab段与靶细胞(病毒感染的细胞及肿瘤细胞)表面抗原决定簇特异性结合后,其Fc段可与有FcγR的杀伤细胞(NK细胞、单核-巨噬细胞、中性粒细胞)等效应细胞结合,触发效应细胞的杀伤活性,直接杀伤靶细胞(病毒感染的细胞及肿瘤细胞),这个过程称为ADCC。 其中抗体与靶细胞上的抗原结合是特异性的,而表达FcR细胞的杀伤作用是非特异性的。Fc受体主要有FcγRⅠ(CD64)、FcγRⅡ(CD32)和FcγRⅢ(CD16)3种。其中FcγRⅡ和FcγRⅢ受体可进一步细分为FcγRⅡa(激活性受体)、FcγRⅡb(抑制性受体)和FcγRⅡc(激活性受体),以及FcγRⅢa(激活性受体)和FcγRⅢb(没有胞内区,通过糖基磷脂酰肌醇锚定在细胞表面)。不同的免疫细胞种群表达特定的Fc受体,例如中性粒细胞通常表达FcγRⅠ、FcγRⅡ和FcγRⅢb,而NK细胞只表达低亲和力FcγRⅢa。FcγRⅢa通常认为是引起ADCC的关键受体,所以NK细胞被认为是介导ADCC的主要细胞。激活的NK细胞分泌穿孔素和颗粒酶等细胞毒颗粒直接杀死肿瘤靶细胞,同时也分泌IFN-γ等细胞因子和化学因子来调控其他免疫细胞。 二、 介导ADCC的效应细胞 目前ADCC在抗肿瘤和抗感染领域均有重要应用,因此了解ADCC相关的效应细胞具有重要意义。常见的ADCC效应细胞为外周血单个核细胞(PBMC)和NK细胞,具有各自不同的优缺点。 因此,为保证ADCC试验的成功性,良好的PBMC和NK细胞的供应是必不可少的。 三、IPHASE相关产品 IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,凭借先进的技术和专业的技术人才,可为广大客户提供经ADCC验证的PBMC及从PBMC中分离、纯化的NK细胞,确保试验的可重复性和准确性,助力客户高效研究ADCC试验! 规格 保存方式 PBMC 5m /10m /50m 新鲜/冻存 NK细胞 2m /5m 冻存 IPHASE技术人员将PBMC、肿瘤细胞(Raji)与抗体药物利妥昔单抗(RTX)共孵育,同时不含RTX组为对照组。经观察发现,试验组(含RTX)较对照组而言,抗体药物浓度越高,杀死的肿瘤细胞越多,并最终趋于一个最大值。说明此批次PBMC ADCC效应的杀伤率可达30%以上,是客户进行抗肿瘤或抗感染研究的不二选择! 有效性 IPHASE可提供经ADCC效应验证的PBMC,为客户省时省力 合规性 IPHASE提供捐献者签署的知情同意书,来源清晰可溯源 同时,IPHASE还提供从新鲜全血中分离得到的NK效应细胞,以细胞计数仪计数,发现NK细胞活率为97%,并经CD3-APC和CD56-FITC抗体进行流式检测,验证得到NK细胞的纯度为92%,结果表明IPHASE NK细胞具有良好的活率和纯度,为客户试验研究提供多种选择。 高活率 IPHASE提供NK细胞复苏率可达85%以上 高纯度 IPHASE提供NK细胞纯度可达85%以上 专一性 IPHASE提供NK细胞是ADCC效应的主要细胞,为客户省时省力 安全性 IPHASE提供产品的捐献者均为健康供体,经过预筛选,且病毒检测为阴性(HIV-1/2,HBV,HCV,梅毒) IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES CO,LTD / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 成功推出金黄地鼠原代肝细胞 2024-04-25
金黄地鼠(Golden hamster; Mesocricetus auratus)又称叙利亚地鼠,源于叙利亚,其色金黄,成年地鼠体重约为120-150克,共22对染色体。目前世界各国饲养的不同品系的金黄地鼠,均源于同一祖先,在遗传学上具有相近血缘。中国也于上世纪40年代将金黄地鼠引入。因此,金黄地鼠作为实验动物的重要一员,无论在国际还是国内,其使用量和使用范围仅次于小鼠、大鼠和豚鼠,位居啮齿类第4位。 一、 金黄地鼠在生物医学中的应用 金黄地鼠在生物医学中有着广泛的应用,包括肿瘤学、生理学、遗传学、传染病学、组织移植、组织培养、啮齿、内分泌及营养学等多种疾病、学科的研究。 应用领域 应用简述 金黄地鼠优势 肿瘤学 肿瘤移植、增殖、致癌、抗癌药物筛选等研究 金黄地鼠对移植瘤接受性强,比其它实验动物易生长;肿瘤组织接种于颊囊中易于生长,利用颊囊观察对致癌物的反应 生理学 生殖生理研究 妊娠期短,繁殖速度块,发情周期准确 传染病学 小儿麻疹病毒、溶组织阿米巴、利氏曼原虫和旋毛虫等传染病研究 自发性感染性疾病种类很少,对实验诱导发病很敏感 组织移植 皮肤、心脏、胰腺等移植研究 同群金黄地鼠皮肤易接受移植,并可以长期存活 组织培养 组织细胞体外培养,疫苗制备等研究 金黄地鼠组织细胞体外培养容易建立二倍体细胞株;肾细胞可被做成细胞培养物接种病毒,用以分离或制备疫苗 营养学 维生素缺乏症等研究 对维生素A、B及E缺乏敏感 牙科医学 龋齿研究 金黄地鼠龋齿的产生与饲料的成分以及口腔内微生物的种类、数量密切相关,适宜建立龋齿动物模型 低温生理代谢 冬眠及生理代谢研究 金黄地鼠室温低(8℃)时会冬眠,可做人工诱导低体温及其生理代谢实验研究 二、 金黄地鼠原代肝细胞的重要性 原代肝细胞(Primary hepatocytes)是指从动物肝脏直接分离的肝实质细胞,原代肝细胞因具有较好的体外试验重现性,基本维持了肝脏的代谢功能,特别是较好的保留了与体内一致的酶水平,成为了体外药物试验的“金标准”,广泛应用于药物代谢与毒理学研究中。 原代肝细胞作为一种体外模型,具有其它体外模型不可替代的优点:①与体内环境保持一致,酶量和辅助因子水平都是正常的生理浓度,可以在接近生理状态的的情况下研究药物的代谢和毒性;②较好保留和维持了肝细胞的完整形态和肝细胞体外代谢活性,真实反应了体内的代谢情况;③无须担心动物实验的伦理问题,亦可减少动物实验所需要的的成本开支,实现了减少(Reduction)、替代(Replacement)、优化(Refinement)的3R伦理原则。 鉴于金黄地鼠实验模型在生物医学领域应用广泛,研发其原代肝细胞对于疾病治疗、药物早期开发与筛选等方面均具有重要的意义。 三、IPHASE推出冻存新形式—颗粒冻存 颗粒冻存是玻璃化冻存的一种形式。玻璃化冷冻法的基本原理是将高浓度的冷冻保护剂在超低温环境下凝固,形成不规则的玻璃化样固体,保存了液态时正常分子和离子分布,因而在细胞内发生玻璃化时能起到保护作用。所保存细胞在冷冻保护液中脱水到一定程度后,则引起内源性胞质大分子如蛋白质及渗透到胞内的冷冻保护剂浓缩,从而使细胞在剧烈的快速降温中得到保护。 因此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,凭借先进的设备,专业的技术人员和多年研发的经验,成功推出可进行颗粒冻存的金黄地鼠悬浮原代肝细胞,为客户进行药物开发等研究提供新选择。 名称 规格 悬浮金黄地鼠肝细胞 5 million 图1 IPHASE颗粒冻存细胞示意图 IPHASE技术人员成功从混合雄性金黄地鼠中分离得到悬浮原代肝细胞并进行药物稳定性试验验证。技术人员以终浓度为1μM维拉帕米为阳性药物,分别测定0min、5min、15min、30min、60min及90min下剩余药物百分比,发现药物随着时间延长而逐渐减少,并最终得到维拉帕米的半衰期在13.9min,其体外固有清除率为0.498 ml/min/ million cells,符合试验结果要求,表明IPHASE悬浮金黄地鼠肝细胞分离成功! 合规性 IPHASE生产产品的组织均由正规渠道获得,来源清晰。 安全性 生产动物经过传染源检测,保证产品质量安全。 活性高 IPHASE技术人员以7-乙氧基香豆素为底物验证细胞色素CYP450酶的活性,结果表明满足顾客需求。 复苏率高 IPHASE冻存金黄地鼠原代肝细胞复苏率可达90%以上。 可定制 可根据客户特殊需求,提供特殊种属、特殊组织细胞的定制服务。 除最新成功分离得到的悬浮金黄地鼠原代肝细胞以外,IPHASE技术人员亦从人、猴、犬、大鼠、小鼠、猪、兔等多个种属中分离得到相应的悬浮/贴壁原代肝细胞,并进行药物稳定性及酶活测定试验,结果均满足客户需求,可为不同领域客户提供多种属、多规格的原代肝细胞,助力为客户药物开发、试验研究提供多方向、多选择! 产品描述 规格 人原代肝细胞 4-6million 食蟹猴肝细胞 2/5 million 恒河猴肝细胞 2/5 million 比格犬肝细胞 2/5 million SD大鼠肝细胞 2/5 million ICR/CD-1小鼠肝细胞 2/5 million 小型猪肝细胞 2/5 million 新西兰兔肝细胞 2/5 million 肝细胞代谢培养基 10mL 肝细胞复苏培养基 10mL 肝细胞铺板培养基 20mL 肝细胞维持培养基 50mL IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES/汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
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