support@iphasebio.com
生命科学
酶联免疫吸附测定
流式细胞术
细胞分选
细胞培养
酶联免疫吸附测定

酶联免疫吸附测定 (ELISA) 是一种广泛应用于生物学和医学科学的免疫酶技术,用于定量测定各种生物基质样品中的抗体、抗原、糖蛋白、糖脂等分子。ELISA检测法依赖于抗原-抗体相互作用,结合酶/底物的催化作用,可以特异性识别复杂生物基质中目标分子。目前主要有4种形式的 ELISA 方法,包括直接 ELISA检测法、间接 ELSIA检测法、夹心 ELISA检测法和竞争性 ELSIA检测法。无论采用哪种形式,重要的是选择合适的固定抗原或捕获检测抗体对,以确保方法的特异性和灵敏度。

流式细胞术

流式细胞技术 (FCM) 是利用流式细胞仪将单个细胞传送通过光测量点,经不同波长的散射光,检测到具有荧光标记抗体(和细胞表面抗原组合)的细胞,并在细胞图上记录出来。 FCM 的优势是在于可以在短时间内(几十秒到几分钟)测量大量单个细胞,从而可以揭示细胞群的异质性,并且可以识别、量化和分类不同的细胞亚群以供进一步研究。 FCM越来越多地应用于细胞周期、细胞生理学、免疫表型等研究领域。

细胞分选

磁性细胞分选技术是利用磁性粒子偶联识别细胞表面抗原的高特异性抗体分离特定亚群的活细胞。基于磁场的磁性选择和抗体-抗原的相互作用,将目标细胞从血液或组织中分离出来。该技术被广泛用于从人和动物组织或血液样本中分离全T细胞、CD4+T细胞、单核细胞、B细胞、干细胞、NK细胞、树突细胞、内皮细胞、肿瘤细胞、白细胞、粒细胞等。特定的细胞亚群从磁珠中释放出来,几乎不受任何损伤,可直接用于细胞培养、流式细胞术和基于细胞的检测等下游应用。

细胞培养

细胞培养技术使得在实验室内体外模拟细胞分化和代谢功能成为可能。

原代细胞是从人类或动物供体组织中直接分离出来的细胞,已高度分化且接近起源组织,但通常不具有增殖性。而永生化的细胞系是从肿瘤或组织中分离出来的、可在体外培养并稳定增殖的细胞,但通常在遗传学和表型上与其起源细胞存在较大的差异。

就培养方法而言,多数源自组织的细胞,比如胚胎 (hESCs) 和间充质干细胞、纤维细胞或肝细胞,需要在细胞培养瓶或多孔板或滚瓶的表面贴壁生长。贴壁培养的细胞增殖受到培养容器的可用表面积的限制。血液细胞系或经驯化后的一些组织细胞也可在摇瓶中悬浮生长。经改造的工程细胞系可悬浮培养于生物反应器中,用于大规模生产生物类药品。

应用科学
药物筛选
遗传毒性研究
生物分析
室间质评与能力验证
药物筛选

新药开发过程通常包括临床前研究、临床试验、报批和生产上市4个阶段。药物代谢研究在新药开发的前两个阶段具有重要的指导意义,尤其是在代谢信息不明确的开发早期。

通过利用各种体外代谢模型对候选化合物的代谢特性(如代谢稳定性、代谢产物生成、代谢表型、酶抑制IC50等)进行高通量筛选,可以对代谢过快或生成毒性代谢物的候选化合物进行结构改良,或通过合成活性代谢物或模拟活性代谢物的结构得到新的候选化合物。

与体内代谢研究相比,体外代谢研究可在新药研发早期利用候选化合物的体外代谢参数合理预测候选化合物的体内药动学行为,指导后期药效、药动以及安全性评价的模型选择,缩小体内研究的筛选范围。

遗传毒性研究

遗传毒性研究(Genotoxicity Study)是药物非临床安全性评价的重要内容,与其他研究尤其是致癌性、生殖毒性等研究有着密切的联系,是药物进入临床试验及上市的重要环节。拟用于人体的药物,应根据受试物拟用适应症和作用特点等因素考虑进行遗传毒性试验。遗传毒性试验是指用于检测通过不同机制直接或间接诱导遗传学损伤的受试物的体外和体内试验,这些试验能检测出DNA损伤及其损伤的固定。

遗传毒性试验方法有多种,根据试验检测的遗传终点,可将检测方法分为三大类,即基因突变、染色体畸变、DNA损伤;具体的试验内容包括细菌回复突变试验(Ames试验),体外染色体畸变试验,体外微核试验,体外小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因突变试验,HGPRT基因突变试验,彗星试验等。

IPHASE品牌针对遗传毒性各项试验,分别开发出遗传毒性Ames试剂盒,体外染色体畸变试剂盒,体外微核试验试剂盒,TK染色体畸变试剂盒,HGPRT基因突变试剂盒,彗星试验试剂盒等,大大提高各个遗传毒性试验的完成效率,省去试验试剂配制准备验证等各个环节,大大缩短实验人员实验时间。

生物分析

质谱检测中,不可避免的会遇到基质效应,为了验证基质带来的影响,需要使用空白基质,若分析物为外源性物质(大多数药物,环污染物等)都可以使用正常人或动物的生物样品(血浆,血浆,尿液,胆汁等)作为正常的BLANK,单如果分析物为内源性物质(正常人或动物体内本身含有的皮质醇,胆红素,维生素等),就很难获得空白基质,这种情况下,想要去除生物样本中的内源性物质很难完成,可以使用人工基质,模拟人体或动物体内环境配置而成,成分明确,有效解决内源性物质干扰问题。

IPHASE品牌空白生物基质产品,包括不同种属动物空白血清,血浆,尿液,胆汁,粪便,组织等空白基质,人工血浆,人工尿液,人工胃液,人工小肠液等人工基质,为创新药物研发机构生物分析研究,大分子药物生物分析,小分子药物生物分析,如方法学开发,方法学确证,药代动力学分析,毒代动力学分析等提供专业产品与专业服务。

室间质评与能力验证

室间质量评价也被称作能力验证,是国际公认的临床实验室全面质量管理的重要组成部分,也是医疗机构质量管理的重要内容。室间质量评价是为确定某个实验室进行某项特定校准或检测能力以及监控其持续能力而进行的一种实验室间的比对。

IPHASE拥有专业的综合分子检测平台,十余年分析检测经验,长期为中国疾病预防控制中心,国家食品安全风险评估中心,卫健委临床检验中心,北京市临床检验中心提供能力验证相关标准物质与质控品。

技术应用:
IPHASE尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)表型研究整体解决方案 2023-06-30
1    UGTs表型研究的重要性 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)家族是人体内仅次于CYP450家族的第2大药物代谢酶,是一类位于内质网内膜的膜蛋白,能够催化葡萄糖醛酸从尿苷二磷酸葡萄糖醛酸上脱去并转移至受体分子上,生成受体分子的葡萄糖醛酸结合物。临床上常用的药物中约10%的药物代谢主要由UGT参与。 为获得更好的治疗效果,联合用药在临床药物治疗中非常普遍。但在获得更好的疗效的同时,常常伴随着由药物-药物相互作用(drug-drug interaction, DDI )引起的不良事件的发生。对于以代谢消除为主的药物,如果由单一代谢酶消除的比例较大,则当其与该代谢酶的抑制剂和/或诱导剂联用时发生代谢性DDI的可能性也较大。因此,药物代谢酶表型鉴定研究已成为临床前药物代谢研究的重要内容之一。 2    IPHASE UGTs表型研究整体解决方案 目前,化学抑制法和重组酶法是酶表型研究最常用的方法,而UGT1A1、UGT1A3、UGT1A4、UGT1A6、UGT1A9、UGT2B6、UGT2B15七种酶是UGT表型研究关注的重点,但因UGT酶暂未筛选出较为全面的选择性较强的抑制剂,重组酶法常为其研究的首选方法,也是最有效的手段。 IPHASE凭借专业的研发团队和先进的蛋白表达平台,现已开发出UGT1A1、UGT1A4、UGT1A9等多个高品质的UGT重组酶,助力于药物的UGT表型研究。 l   酶活高  酶活可对标或高于同类进口产品。 IPHASE选用自研UGT重组酶和某一知名品牌UGT重组酶为代谢系统,在相同实验条件下进行了体外孵育试验,结果显示:IPHASE自研重组酶产品不管是从底物随时间的消除比率还是半衰期均优于竞品公司相同产品。 图1 UGT1A1重组酶数据对比结果 图2 UGT1A4重组酶数据对比结果 图3 UGT1A9重组酶数据对比结果 l   货期短  国内现货,保障客户使用需求。 l   价格低  产品价格低于进口品牌 l   可定制  可根据客户的实际需求,提供重组酶的定制服务。 l   售后服务机制健全  有专业技术人员提供全方位服务。 3    产品信息      产品名称                             规格 人UGT1A1 重组酶              5mg/ml,0.5ml 人UGT1A3 重组酶              5mg/ml,0.5ml 人UGT1A4 重组酶              5mg/ml,0.5ml 人UGT1A6 重组酶              5mg/ml,0.5ml 人UGT1A7 重组酶              5mg/ml,0.5ml 人UGT1A8 重组酶              5mg/ml,0.5ml 人UGT1A9 重组酶              5mg/ml,0.5ml 人UGT1A10 重组酶              5mg/ml,0.5ml 人UGT2B7 重组酶              5mg/ml,0.5ml 人UGT2B15 重组酶              5mg/ml,0.5ml IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
IPHASE课堂开课啦 | 体外药代动力学研究 2023-06-30
体外药代动力学研究作为广泛应用于药物研发过程中各个阶段的方法,可以帮助我们更好的了解药物的药理作用,其药代动力学参数等,而体外药代动力学研究也逐渐成为了药物研发和剂量安排的有利证据。 本年度第三期IPHASE课堂即将开课!7月11日,IPHASE/汇智和源线上交流会将围绕体外药代动力学研究的主题,通过血浆蛋白结合试验、体外代谢、体外DDI、转运体研究等多方面与各位与会嘉宾进行深入探讨,我们期待您的参加! 汇智和源将携手专业技术同事与大家交流 赶紧搬好小板凳 一起get行业干货吧! 举办时间 2023年7月11日 19:00-20:00 联系电话 15910545801 报名方式 关注【IPHASE】公众号回复“参加” 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
重磅出击 | CD8+ 细胞无痕分选试剂盒全面上市 2023-06-27
传统的磁珠分选是基于抗原抗体特异性识别的原理,利用特定抗体偶联磁珠来捕获目的细胞。然后在高强度磁场作用下,将磁珠标记细胞和没有标记的细胞分开。根据分选过程中标记的细胞类型的不同,可将分选分为阳性分选(正选)和阴性分选(负选)。 阳性分选(正选)是指对目的细胞进行标记,直接获得目的细胞。适用于比例较小的细胞群,以及从各种样本来源中得到目的细胞,尤其是对于一些稀有样本或者疾病来源的样本。 ◆  优点:能够获得高纯度的目的细胞,操作简便。 ◆  缺点:细胞被标记了抗体和磁珠。      阴性分选(负选)是指对非目的细胞进行标记和去除,来得到目的细胞。避免直接标记目的细胞,从而来减少细胞活化可能,适用于比较常规的样本,例如人外周血、小鼠脾脏等。 ◆  优势:可以保持目的细胞未受刺激的原始状态,得到的细胞不带有任何抗体和磁珠标记。 ◆  缺点:相对阳选而言纯度较低,成本较高。 那么阴选和阳选究竟应该怎么选择呢? 今天为您介绍的这款产品让您无需迷茫,人CD8+细胞无痕分选试剂盒,兼具了阳选和阴选的优点。能够使用阳选的方式分选CD8+细胞,然后通过无痕洗脱,让您在拥有高纯度的同时,得到的细胞还不带有任何磁珠和其他标记。 1    原理 与传统的阳选使用的特异性抗体不同,人CD8+细胞无痕分选试剂盒采用的是适配体,这是一段特异性的短链核苷酸序列。由于它独特的三级结构,能够通过其三维构象识别靶标分子,并具有很高的结合亲和力(图1)。 图1 重要的是,这种适配体标记是可逆的,是可以去除的。利用与适配体互补的寡核苷酸将细胞洗脱下来。 实验过程包括分选和洗脱: 分选过程,带有磁珠的适配体与PBMC孵育,在磁场作用下,被标记的目的细胞和没有标记的细胞分开(图2a)。 图2a 洗脱过程,带有磁珠的细胞与适配体互补的寡核苷酸孵育,带有磁珠的适配体从细胞上脱落,在磁场作用下,磁珠以及适配体和目的细胞分开(图2b)。 图2b 可以看出,整个洗脱过程操作非常简单,除了磁极,无需任何其它工具,只需要加入互补的寡核苷酸链,室温孵育10分钟后,通过磁极分离细胞和磁珠,即可实现CD8+细胞的洗脱。洗脱下来的CD8+细胞不带有任何标记。 2    相关数据 我们一起来看看,人CD8+细胞无痕分选试剂盒的试剂应用效果怎么样? | 高纯度 起始样本为新鲜提取的人的PBMC细胞,起始样本和分选后的CD8+细胞的纯度分别为23.0%和98.2%(图3)。 图3 | 无痕 洗脱后的细胞CD8+细胞纯度≧98%,活率≧90%。整个过程细胞得率在70~90%之间。与国外某进口品牌的阴选相比,纯度更高(图4)。 图4 3    相关产品 产品信息                                   种属                分选方法 CD3+ T细胞分选试剂盒          人/小鼠             阴选/阳选 CD4+ T细胞分选试剂盒          人/小鼠             阴选/阳选 CD8+ T细胞分选试剂盒          人/小鼠             阴选/阳选  单核细胞分选试剂盒             人/小鼠             阴选/阳选   B细胞分选试剂盒                人/小鼠             阴选/阳选  NK细胞分选试剂盒                人/小鼠             阴选/阳选 CD8+细胞无痕分选试剂盒          人                无痕分选 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
UGT重组酶基础知识介绍 2023-04-26
尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)是人体重要的II相代谢酶,具有代谢药物和内源性物质的重要作用,其广泛分布于肝、肾、呼吸道、肺、胃、小肠、结肠等多种组织器官中。然而,由于肝脏是发生II相代谢的主要器官,大部分的UGT酶在肝脏中表达。 1    UGT家族的作用机制 UGT酶是位于内质网腔侧面的一类微粒体糖蛋白,是人体内重要的催化Ⅱ相结合反应的酶,占所有药物II相代谢的35%左右。 UGT酶和内源性物质的相互作用具有重要的研究价值,该蛋白能够催化内源性物质(如胆红素、类固醇激素和脂溶性维生素等)或外源性物质(药物、食物、环境毒物等)与尿苷二磷酸葡糖醛酸(Uridine Diphosphate Glucuronic Acid,UDPGA)结合,使其水溶性增加,能有效地从尿或胆汁中排出,是生物体内一个重要的解毒机制。 除此之外,因为一些内源性物质的信号终止同样也依赖于UGT酶,而这些信号及时终止可以防范组织过度增生,甚至可以抑制肿瘤的发生。 2    UGT家族的特征 随着研究发现,人类的UGT超家族根据核苷酸序列的相似性分为:UGT1、UGT2、UGT3和UGT8四个家族,迄今为止已经确认了46个UGTs亚型,其中UGT1主要参与酚和胆红素的代谢,UGT2主要参与类固醇的代谢。 图1 人类UGTs酶系统分类图 尽管UGT1和UGT2家族都参与了各种代谢反应,但其基因结构、定位等存在明显的差别。所有UGT1家族成员共用第2-5外显子(编码C末端UDPGA结合区)。剩余的13个外显子,分别为9种UGT1A蛋白和4个假基因的第1外显子(编码N末端,底物结合区)。因为UGT1家族有共同的C末端,所以,有一定的底物重叠性。但也因为其单独的底物结合域,而具有一定的底物特异性。 图2 人类UGT1家族 图片来源:周琼. 含甲氧基黄酮类化合物UGT代谢特征及其机理研究[D]. 南方医科大学, 2010. UGT1A9主要表达于肝脏、肾脏,底物有毒物(如酚类N-羟芳香胺,N-羟萘胺,蒽醌)内源性物质(如雌激素,类固醇)和一些药物(如地西泮、香豆素、麦考酚酸等)。UGT1A9基因迄今共发现21种等位基因,其中位于启动子的有11个,第1外显子中有4个,第1内含子中有6个。 图3:重组酶UGT1A9代谢稳定性 3    IPHASE重组UGT酶产品 IPHASE/汇智和源凭借多年的产品自主研发经验,不断扩充了本公司重组UGT酶产品类别。包括:UGT1A1、UGT1A3、UGT1A4、UGT1A6、UGT1A7、UGT1A8、UGT1A9、UGT1A10、UGT2B7、UGT2B15、UGT2B17重组酶等。 我们专注于提供高质量的重组UGT酶,致力于不断提升品控、改善活性,长远的助力于您的研究。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
LC-MS/MS生物样本分析中内源性物质检测的替代生物基质解决方案 2023-04-21
1    简介 LC-MS/MS技术是生物样本分析、代谢产物检测最常用的生物分析技术之一,检测的物质包括外源性物质和内源性物质。研究人员常通过把待测物添加到空白基质中配制成定量标准曲线样本和质控样品模拟实际样本,通过标准曲线定量出生物样本中待测物的浓度。 内源性物质即体内天然存在的物质,内源性物质相关药物近些年成为新药研发的重要方向。伴随着大量内源性物质药物的诞生,对内源性物质药物的生物分析也越来越重要。然而,目前FDA等国内外药品评审机构生物样本分析方法验证主要是针对外源性物质,包括精密度、准确度、基质效应、回收率、稳定性等。由于内源性物质的检测在获取空白基质模拟实际样本时因自身影响导致检测结果出现问题,替代生物基质(人工基质)的出现就解决了这一问题。 内源性物质的生物分析目前主流分析方法有四种,包括替代基质法,替代待测物法,标准加入法和背景扣除法。本文重点就替代基质法做重点介绍,这种方法的特点是成本低,获取简单。 替代基质法流程图 替代基质法是采用替代生物基质(人工基质)和内源性物质建立校准曲线,分析内源性物质浓度。 IPHASE Purified Serum Vitamin Test Results IPHASE/汇智和源针对无法获得无/低干扰真实生物基质的问题,研发生产一系列替代生物基质产品,包括人工血浆,人工尿液,人工唾液,人工胃液,人工肠液,人工脑脊液等,一方面最大限度的模拟了真实生物基质的组分和配比,另一方面还避免了真实基质中内源性物质的干扰,保证分析方法的准确度。 2    相关产品 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
重组蛋白基础知识介绍 2023-04-14
重组蛋白(recombinant protein)是指应用重组 DNA 或重组 RNA 技术而获得的蛋白质。重组蛋白工程先应用基因克隆或化学合成技术获得目的基因(gene of interest,GOI),连接到适合的表达载体,导入到特定的宿主细胞,利用宿主细胞的遗传系统,表达出有功能的蛋白质分子。 图1 基因工程的操作步骤  图片来源于《哺乳动物细胞重组蛋白工程》 目前,重组蛋白试剂已被广泛应用于生物药、细胞免疫治疗及诊断试剂的研发和生产中。其中重组蛋白药物是生物药物的重要组成成分,常被被广泛应用于医疗领域,包括肿瘤治疗、免疫调节、神经保护、结缔组织疾病、肾病治疗等。包括细胞因子类、抗体治疗性疫苗、激素及酶等。 1    发展历程 20世纪70年代以来,随着基因工程技术的诞生与发展,科学家逐渐从动物脏器、组织或人类血液提取蛋白质的方式转变为利用基因工程生产蛋白质。 1972年,基因重组技术创立,成为重组蛋白药物的技术起点。1982年,第一个重组蛋白药物——重组人胰岛素上市,开启了重组蛋白药物发展的光辉历史。1985年、1986年世界上第一个基因重组人生长激素、重组人干扰素分别问世。 此后,从20世纪90年代后期到21世纪初,重组蛋白药物产业迎来黄金发展期,一批重磅药物相继上市。近年来,随着阿达木单抗、PD-1单抗等一批明星产品上市,重组蛋白类药物的研发风向逐渐向单克隆抗体、双克隆抗体药物转变,重组蛋白药物也焕发出崭新活力。 2    重组蛋白常见表达系统及相应优缺点 当前,生产重组蛋白主要有四大表达系统:原核细胞(主要是大肠杆菌)、酵母细胞、昆虫细胞、以及哺乳动物细胞表达系统。此外,我们也可以利用植物、动物器官(如乳腺等)生产重组蛋白。 图2 表达系统的优缺点 3    IPHASE重组蛋白产品 IPHASE凭借多年的产品自主研发经验,不断扩充了本公司重组蛋白产品类别: 白细胞介素:IL-1,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5……IL-35等; 胸腺基质淋巴细胞生成素:TSLP Protein系列; 重组人粒细胞-巨噬细胞:GM-CSF Protein系列; 白细胞分化抗原:CD2、CD3、CD7、CD8、CD15、CD16等; 细胞程序性死亡配体:PD-L1 Protein系列; 重组酶:重组CYP系列以及重组UGT系列; ...... 我们专注于提供高质量的重组蛋白,致力于不断提升品控、改善活性和降低内毒素水平,长远的助力于您的研究。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
人外周血单个核细胞(PBMC)——ADCC过程中的“主角” 2023-04-13
1    PBMC简介 外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell ,PBMC)是具有单个细胞核的血细胞,如淋巴细胞(T细胞、B细胞、NK细胞等)、单核细胞或巨噬细胞,是多种免疫细胞的合称。外周血单个核细胞是造血干细胞(HSC)在骨髓中发育而来的,是外周血中帮我们抵御疾病和感染的重要防线。 2    PBMC在ADCC中的应用 PBMC被广泛用于药物研发中,颇具代表性的是抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用 (Antibody-dependent cell-mediated cytoto-xicity ,ADCC)。 抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用,顾名思义,是依靠抗体介导杀伤细胞来杀伤靶细胞。具体过程可理解为:抗体的Fab段结合在靶细胞抗原表位上。抗体的Fc段与NK细胞(因NK细胞是能发挥ADCC作用的主要细胞,故以此举例)表面的FcR结合,从而NK细胞活化,穿孔素、颗粒酶被释放。穿孔素、颗粒酶从靶细胞膜上形成的“孔道”进入胞内,通过激活凋亡相关的酶使靶细胞凋亡。 图1 ADCC效应概述图 在以上过程中,为了使效应细胞释放的细胞毒物质充分作用于靶细胞,良好的效应细胞(如新鲜的PBMC)供给在ADCC的研究中是必不可少的。另外,ADCC也常用来评估药物研发中抗体的活性有无及强弱,因此一个高质量的PBMC产品用作效应细胞尤为重要。 3    我们的PBMC PBMC分离过程的专业性,关系着后续研究能否顺利开展。我司专业人员采用独家细胞纯化技术,最大程度保证PBMC的纯度。严格的工艺流程保证了细胞复苏的活率。用更安心、更专业的方式为您呈递优质的实验材料。 IPHASE/汇智和源拥有丰富的产品库,涵盖多种属动物PBMC产品,如:人、猴、犬、猪、兔、大鼠、小鼠……可最大程度满足客户的需求。 以猴为例,在经过24小时的培养后,我司猴PBMC的细胞活率仍可达到75.0%,细胞数也能保证在18.1×10^6以充分满足广大客户的科研需要。 图2 猴PBMC培养前后的细胞活率与细胞数 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
抗体基础知识介绍 2023-03-30
抗体(antibody,Ab)是机体在体内存在的外来分子、微生物等抗原物质刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulins,Ig),主要分布在血清中,也分布于组织液及外分泌液中。 1    抗体的发展历程 抗体技术是免疫学领域的一个重要方面,在生命科学和医学各学科得到了广泛应用。随着生物学技术的不断发展,抗体技术也经历了三个发展阶段。 第一代抗体——血清多克隆抗体(PcAb),早在20世纪初期已发现血清抗体和细菌毒素的作用,并用于多种疾病的治疗。虽然免疫动物制备的血清抗体的免疫原性和非均质性给抗体的研究和应用造成困难,但由于血清多克隆抗体识别抗原的广谱性和识别不同表位的各种抗体或识别同种抗原表位的不同克隆的抗体可协同作用,因而能高效地识别抗原和阻断抗原对机体的危害,所以血清抗体至今仍不失为一种诊治疾病和生命科学研究的有效制剂。 1975年德国学者Köhler和英国学者Milstein合作研究,创立了杂交瘤技术,使第一代抗体发展到第二代抗体——单克隆抗体(McAb)。该研究在仙台病毒介导下,将经绵阳红细胞免疫后的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(P3-X63/Ag8)融合,融合的细胞既获得了亲代脾细胞分泌特异性抗体的特性,又具有骨髓瘤细胞大量繁殖的能力,成为了一种既能分泌特异性抗体又能长命的杂交瘤细胞。这一具有划时代意义的新技术,为抗体的分子生物学研究提供了一个新的手段,同时也为所有需要制备和应用抗体的领域提供了一个全新的方法,极大的促进了免疫学、遗传学、微生物学、分子生物学和基础与临床医学等学科的发展,受到全世界学者的极大关注。 20世纪80年代,在充分认识免疫球蛋白(Ig)基因结构和功能的基础上,人们利用DNA重组技术和蛋白质工程技术,对Ig分子进行基因水平的切割、拼接或修饰,重新组装成新型的抗体分子,成为了继多克隆抗体、单克隆抗体之后的第三代抗体——基因工程抗体(GEAb)。基因工程抗体保留了天然抗体的特异性和主要的生物学活性,去除或减少了无关结构,是目前抗体应用研究的首选技术,且使得抗体的人源化以及制备人抗体成为可能,大大促进了抗体技术领域的发展。 2    抗体分子的基本结构 2.1 重链和轻链 抗体由四条多肽链组成,即两条相同的相对分子质量较小的轻链(light chain,L链)和两条相同的相对分子质量较大的重链(heavy chain,H链)借二硫键连接组成的对称结构。 轻链由214个氨基酸残基组成,分子质量约25kDa。根据轻链氨基酸组成和排列顺序不同(抗原性的差异),可将轻链分为两种类型,即kappa(k)链和lambda(λ)链,故免疫球蛋白也可分为两种类型,即k型和λ型。同一个天然Ig分子上轻链的类型是相同的,但同一机体内可存在两种类型的抗体分子。每条轻链含有两个由链内二硫键组成的环肽。 重链大小约为轻链的2倍,含450~550个氨基酸残基,分子质量约为55~75 kDa。不同的H链由于氨基酸组成和排列顺序以及二硫键的数目和位置不同,其抗原性也不同,根据H链抗原性的差异可将其分为5类,即μ链、γ链、α链、δ链和ε链。每条H链含有4~5个链内二硫键组成的环肽,其中γ链、α链和δ链上含有4个环肽,μ链和ε链含有5个环肽。 图1 抗体结构示意图 2.2 恒定区和可变区 通过对不同免疫球蛋白H链和L链的氨基酸序列比较发现,其氨基端(N端)约110个氨基酸序列变化很大,称为可变区(variable region,V区),而羧基末端(C端)则相对稳定,变化很小,称为恒定区(constant region,C区)(见图2)。 图2 抗体分子的基本结构 可变区位于L链靠近N端的1/2(含108~111个氨基酸残基)和H链靠近N端的1/5(γ、α和δ)或1/4(μ和ε)。L链和H链的V区分别为VL和VH。在每个V区中均有一个由链内二硫键连接形成的肽环,每个肽环含67~75个氨基酸残基。VL和VH中某些局部区域的氨基酸组成和排列顺序具有更高的变异程度,称为高变区(hypervariable region,HVR)。VL和VH中的高变区各有三个,分别称为HVR1、HVR2和HVR3,也可称为CDR1、CDR2和CDR3,一般CDR3具有更高的变异程度。在V区中非HVR部分的氨基酸组成和排列相对比较保守,称为骨架区(framework region,FR),VL和VH中的骨架区各有4个,分别用FR1、FR2、FR3和FR4表示。骨架区对于维持CDR的空间构型具有重要作用。V区氨基酸的组成和排列随抗体结合抗原的特异性不同有较大的变异。由于V区中氨基酸组成和排列顺序千变万化,故可形成许多种具有不同结合抗原特异性的抗体。 恒定区位于L链靠近C端1/2和H链靠近C端3/4(γ、α和δ)区域或4/5(μ和ε)区域。L链和H链的C区分别为CL和CH。H链每个功能区含110多个氨基酸残基,含有一个由二硫键连接的50~60个氨基酸残基组成的肽环。这个区域氨基酸的组成和排列在同一种属动物所有个体的同一类免疫球蛋白具有相同的抗原特异性。不同抗原的IgG类抗体其可变区不同,但恒定区相同。同一抗原的不同类型抗体,其可变区形同,但恒定区不相同,表现为类、亚类或型、亚型的差别。 故根据抗体与抗原的结合位置,抗体结构可分为两部分(见图3):即“Y”字型头部的特异性结合抗原位点的Fab段和尾部相对保守的Fc段。抗体的特异性体现在Fab段,Fab段的抗原结合位点可与细胞上的抗原决定簇发生特异性的结合反应。 图3 抗体分子的基本结构 3    抗体的种类和特性 抗体是具有共同结构和功能形式的一大类糖蛋白。根据重链类型不同,可将抗体分成五类,即IgG、IgM、IgA、IgE和IgD,见表1和图4。 表1 不同抗体类型特点比较表 图4 不同类型抗体结构图 4    IPHASE抗体产品 IPHASE凭借多年的产品自主研发经验,不断扩充了本公司抗体产品类别,现已形成一大批高质量的抗体产品,主要涉及到CD分子抗体、细胞因子抗体、受体抗体和免疫检查点蛋白抗体四类,可用于多个领域的研究,如免疫组化、免疫荧光、免疫印记、酶联免疫、流式细胞术、免疫细胞化学、免疫沉淀和细胞分选等。 CD分子抗体  CD3、CD4、CD8、CD11、CD19、CD20、CD34、CD45、CD56、CD138、CD271等 细胞因子抗体 IL-6、IL-17A、TSLP等 受体抗体 IL-4R、IL-6R、VEGFR2等 免疫检查点蛋白抗体  B7H3、PD-1、PD-L1等 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为遗传毒性研究提供便捷产品。此外,IPHASE/汇智和源可提供特殊产品的定制服务,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
小核酸药体外研究案例分析 2023-03-24
小核酸药物即为寡核苷酸药物,一般是由不超过30个碱基/碱基对组成的核苷酸序列。小核酸药物是指能够与特定的mRNA结合,通过干预mRNA翻译效率,最终达到治疗效果的特定序列的小片段核苷酸。小核酸药物包括反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASO)药物、小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)药物、微小RNA(microRNA,miRNA)药物、RNA适配体(Aptamer)药物等,其中ASO和siRNA是目前主流的小核酸药物研究方向。 1    小核酸药现状 与传统的小分子化学药和重组蛋白类药物相比,小核酸药物具有治疗效率高、特异性强、药物毒性小和应用领域广等诸多优点。目前,全球范围内共有15款小核酸药物获批上市(包含已退市产品),包括9款ASO药物,5款siRNA药物,1款核酸适配体,治疗领域主要涵盖杜氏肌营养不良症(DMD)、转甲状腺素蛋白家族性淀粉样多发性神经病和其他罕见性疾病。 表1 全球已上市小核酸药物 2    小核酸药体外研究案例分析 到目前为止,业界尚无专门针对此类药物药理毒理研究的技术指南,ICH S6(R1)和美国FDA有关细胞和基因治疗的指导原则也仅提到小核酸药物可以参考。尽管小核酸药具备生物制品的属性,但仍按照新化学实体监管,开展相关非临床研究。 表2 部分已上市小核酸药物研究内容汇总 资料来源:王恒, 李华, 汪溪洁,等. 小核酸药物非临床特点和药理毒理评价策略[J]. 中国新药杂志, 2022, 31(12):9. 3    IPHASE小核酸药物相关产品 IPHASE凭借先进的设备、专业的技术人员和多年研发的经验,推出了不同种属动物的肝细胞、肝微粒体、肝S9、肝胞质液、肝溶酶体,ABC转运体囊泡和SLC转运体细胞,遗传毒性研究试剂盒(Ames、TK基因突变、染色体畸变、体外微核、彗星实验等),不同种属的血浆等产品,助力于小核酸药的体外研究。 表3 IPHASE原代肝细胞 表4 IPHASE肝亚细胞组分 表5 IPHASE转运体 表6 IPHASE遗传毒性产品 表7 IPHASE空白生物基质产品 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为遗传毒性研究提供便捷产品。此外,IPHASE/汇智和源可提供特殊产品的定制服务,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
肝微粒体、肝S9、肝胞质液与体外药物代谢 2023-03-13
药物代谢研究是创新药物研发的重要内容,它不仅决定了创新药物制剂研发的成败,而且与创新药物研发的速度和质量有密切关系。由于肝脏是药物代谢的主要场所,体外代谢模型多以肝脏为基础。 1    什么是药物代谢? 临床前研究是新药研发中必不可少的环节,而药物代谢动力学是临床前药理评价的重要组成部分。药物被机体吸收后,在体内各种酶以及体液环境作用下发生化学结构改变的过程成为药物代谢(Drug Metabolism),又称生物转化(Biotransformation)。药物代谢主要在肝中进行,也发生在肠、肾、肺、血液和皮肤等器官。药物在体内的生物转化,分为Ⅰ相代谢反应和Ⅱ相代谢反应。药物分子上引入新的基团或除去原有小基团的官能团反应称为Ⅰ相代谢,包括氧化、还原和水解等反应。药物或Ⅰ相代谢产物与体内某些内源性小分子结合的反应为Ⅱ相代谢,亦称为结合反应,如葡萄糖醛酸结合、磷酸化、甲基化、乙酰化、谷胱甘肽结合等反应。多数亲脂性的药物吸收后,经Ⅰ相代谢可变为极性和水溶性较高的代谢产物,有利于Ⅱ相代谢的进行而增加极性。Ⅱ相代谢是真正的“解毒”途径,其代谢产物通常具有更好的水溶性,更易经尿液和胆汁排出体外。 2    肝亚细胞模型在药物体外研究中的应用 药物生物转化中的一个关键且复杂的问题是如何将体外研究的结果进行外推,建立体内-体外的相关性,从而预测药物在人体内的代谢行为,进而预测药物的有效性和安全性。要相对准确的进行此类预测工作,合理的体外研究模型的选择非常关键。肝亚细胞模型如肝微粒体(Liver Microsomes)、肝S9(Liver S9 Fractions)、肝胞质液(Liver Cytosol)因其应用操作简单、价格合理、储存方便,在药物代谢的初期筛选方面得到了广泛应用。 表1 不同肝亚细胞模型的优缺点和应用 2.1 肝微粒体(Liver Microsomes) 肝微粒体是指肝组织在匀浆和差速离心过程中获得的由破碎的内质网自我融合形成的近似球形的膜囊泡状结构,包含了CYP450酶和一些Ⅱ相酶,如UGTs、ST等。肝微粒体用于CYP450酶研究时,只需要加入NADPH或NADPH的再生系统即可启动反应。对于UGT酶活性的研究,则需加入尿苷二磷酸葡萄糖(UDPGA)和丙甲菌素启动反应。 由于肝微粒体是Ⅰ相代谢酶的主要来源,故肝微粒体在体外药物代谢研究中被广泛使用。肝微粒体不但可以为系统的药物代谢提供定性的信息,而且可以在药物研发过程中用于大量化合物代谢稳定性的筛选及优化,同时可以用于评价潜在的药物药物相互作用。 2.2 肝S9(Liver S9 Fraction) 肝脏S9是肝组织去除匀浆沉淀物后的含有代谢所需成分、具有完整代谢功能的混悬溶液。相对于微粒体和胞质液,S9包含了完整的I相和Ⅱ相代谢酶的活性,能更完整地用于药物的代谢轮廓研究。 有的药物经过I相代谢后又经过Ⅱ相代谢,形成一些特定的代谢产物,这样的代谢产物往往在微粒体或胞质液的体系中不容易被发现。因S9具有完整的酶系,可以用于代谢产物系统的定性研究。由于该系统中代谢酶活性相对于微粒体和胞质液低,代谢产物的形成量也很少,往往不容易被检测到。同时,因该体系中含有大量的脂类物质和其它蛋白质,容易降低药物的游离程度,从而使实验结果出现偏差。 2.3 肝胞质液(Cytosol) 肝胞质液包含了可溶性的Ⅱ相代谢酶,如NAT、GST、ST、TPMT等,在很多化疗药物的激活与解毒过程中发挥重要作用。与I相酶一样,Ⅱ相酶发生代谢反应同样也需要外源性的辅酶来催化。例如,NAT需要乙酰辅酶A(acetyl CoA)、二硫苏糖醇(DTT)和乙酰辅酶A的再生系统来催化;ST需要腺苷-3’-磷酸-5’-磷酰硫酸(PAPS)来催化;GST需要谷胱甘肽来催化。由于该体系中只有Ⅱ相代谢酶存在,且相对于肝S9来讲酶活还很高,因此可通过加入不同的辅酶来单独研究某个亚型酶的代谢。 3    IPHASE产品及优势 IPHASE凭借先进的设备、专业的技术人员和多年研发的经验,开发出了不同种属动物的肝微粒体、肝S9、肝胞质液等产品,助力于药物的体外代谢研究。 l  酶活高 酶活可对标或高于同类进口产品 l  批量生产 采用批量生产方式,库充充足,可保证同一批次产品的供应 l  货期短 国内现货,保障客户使用需求 l  售后服务机制健全 有专业技术人员提供全方位服务 l  可定制 可提供特定物种、特定模型和特定年龄等非常规样品的定制服务 图2 某药物在不同种属动物肝微粒体中的I相代谢稳定性 图3某药物在人肝微粒中的代谢抑制率 表2 IPHASE肝微粒体(Liver Microsomes) 表3 IPHASE肝S9(Liver S9 Fractions) 表4 IPHASE肝胞质液(Liver Cytosol) IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
苏州总部:江苏省昆山市花桥镇新生路1号顺扬智汇谷A1幢2楼202室
电话:400-127-6686
电子邮件:support@iphasebio.com

咨询
提交

400-127-6686
support@iphasebio.com
Copyright © 2021 汇智和源生物技术(苏州)有限公司  苏ICP备2023035694号  网站支持:中企动力